如何设计primer-如何如何使用primer primer设计引物

一、PCR引物设计原则

二、Primer Premier 5.0软件设计引物

三、引物设计步骤

①输入序列:安装好软件后,首先打开软件,左上角来操作,file-new-dna sequence,这一项可以把复制的序列粘贴进去,也可以选择另一个file-open-dna sequence去open一个新的文件。②点击Primer进入引物设计界面。③点击引物设计界面上的search按钮进行搜索选项设定。④点击搜索选项界面上的OK按钮可得到引物设计结果。⑤选择分值高的引物对作为实验合成引物选项。⑥根据需要对引物进行编辑。

首先得下载安装一个primer5 的软件,网上百度搜索后即可下载获得

点击File下拉菜单,选择New,然后选择DNA Sequence

从word文件中copy目标序列,然后control+V到primer5的文本框中,选择As is,点击OK。

设计引物前得进行酶切位点分析,所以要点击Enzyme按钮,选择Add添加目标酶,然后点击OK进行分析检测

完成上面之后,我们开始点击primer选项设计引物

点击S/A,分别代表设计上游/下游引物,这里我们就点击S为例来设计上游引物

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设计好之后往往需要根据作者的需要进行编辑,这时就点击Edit primers,然后出现以下界面,作者就可以进行编辑修改了,这样就基本完成获得你所需要的引物了

进入软件,genetank窗口file---new----DNA sequence进入序列输入版块。然后control+v输入序列,如不改变序列,选择AS菜单。

然后进入primer引物设计。进入search,点OK。系统自动生成引物。

选你需要的就可以了。(有评分)。如要克隆基因,则在primer菜单下手动设计。